La criopreservación de tejido testicular

La criopreservación de tejido testicular antes de cultivo celular testicular a largo plazo no altera en la dinámica de células in vitro
La criopreservación de tejido testicular antes de cultivo celular testicular a largo plazo no altera en la dinámica de células in vitro

La criopreservación de tejido testicular antes de cultivo celular testicular a largo plazo no altera en la dinámica de células in vitro

Objetivo
Para evaluar si la dinámica celular testicular se alteran durante el cultivo a largo plazo después de la criopreservación de tejido testicular.

Diseño
Estudio de la ciencia básica experimental.

Ajuste
Laboratorio de biología reproductiva.

Paciente (s)
Tejido testicular con la espermatogénesis normal se obtiene a partir de seis donantes.

Intervención (s)
Ninguno.

Principales medidas de resultado (s)
La detección y comparación de las células testiculares de tejidos frescos y congelados durante el cultivo a largo plazo.

Resultado (s)
Células testiculares humanos derivados de fresco (n = 3) y criopreservados (n = 3) los tejidos se cultivaron durante 2 meses y se analizaron con la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa cuantitativa e inmunofluorescencia. Espermatogonias incluyendo células madre de espermatogonias (SSC) se detectaron de forma fiable mediante la combinación de VASA, un marcador de células germinales, con UCHL1, un marcador expresado por espermatogonias. La estrella establecida marcadores, ACTA2, y SOX9 se utilizaron para analizar la presencia de células de Leydig, células mioides peritubulares, células de Sertoli y, respectivamente. No se encontraron diferencias obvias entre las culturas iniciados a partir de tejidos frescos o criopreservados. Se detectaron grupos individuales o pequeños de SSC (VASA + / UCHL1 +) en cantidades considerables hasta 1 mes de la cultura, pero con poca frecuencia después de 2 meses. SSCs se encontraron unido a la monocapa alimentador, que expresa marcadores de células de Sertoli, células de Leydig, y células mioides peritubulares. Además, VASA- / UCHL1 + células, muy probablemente procedente del intersticio, también contribuyó a este monocapa. Además de las células de Sertoli, todos los tipos de células somáticas podrían ser detectados en todo el periodo de cultivo.

Conclusión (s)
Tejido testicular puede cryopreserved antes de cultivo a largo plazo sin necesidad de modificar su resultado, que anima a la implementación de la banca tejido testicular de preservación de la fertilidad. Sin embargo, debido al número limitado de SSC disponibles después de 2 meses, una mayor exploración y optimización del sistema de cultivo que se necesita.

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